摘要: 人白细胞介素12(hIL-12)是一种异源二聚体细胞因子，由p40和p35两个亚基通过二硫键连接而成。首先构建了两个表达载体pVL1392-hp40和pVL1393-hp35，并分别与线性化多角体病毒基因组DNA共转染昆虫细胞株Sf9，用目视法筛选出重组病毒AcNPV-hp40和AcNPV-hp35。利用PHA激活的人淋巴细胞增殖试验，在条件培液中检测到重组hIL-12的生物活性，表达量约为1.5～2μg/10 ⁶ 细胞。经实时BIA和Northern blot分析，hp35和hp40两亚基在昆虫细胞中获得表达。非还原条件下的Westernblot结果显示，重组hIL-12的表观分子量为76kDa，hp40同源二聚体的表观分子量为92kDa。重组ph40具有明显抑制hIL-12生物活性的作用。

摘要: 组织纤溶酶原激活剂(tPA)是一种较理想的溶血栓药物，本研究采用其突变体——长效组织纤溶酶原激活剂(LAtPA)的cDNA作为目的基因，将它插入羊β-乳球蛋白(BLG)基因起始密码之前，使LAtPA的转录、翻译受控于BLG基因的5′、3′序列，再将所构建的BLG-LAtPA用显微注射方法建立转基因鼠，经点杂交筛选和Southern印迹鉴定，获得2只LAtPA基因整合阳性鼠，并在阳性母鼠乳汁中检测到有溶纤活性的LAtPA表达，表达水平1.5μg/ml。在这两只转基因鼠的9只F1代子鼠中，有5只是阳性的，tPA表达水平维持在1～2μg/ml，BLGtPA融合基因整合到小鼠基因组，能稳定地遗传给子代。

摘要: 以甲醇酵母( Hansenula polymorpha )表达系统的Yip型表达载体pJF5-1为基础，通过引入宿主来源的一个rDNA随机顺序和由SV40早期启动子控制的G418抗性基因(neo)及对野生型标记基因Hpleu2启动子大部分上游序列的缺失，构建了一个高拷贝整合型表达载体pMIRH。有关转化、筛选和拷贝分析等试验结果表明，由pMIRH可产生含高拷贝数载体的转化子，并可通过由leu2+筛选和G418抗性筛选所组成的二级筛选方法富集这些含高拷贝数载体的转化子。有关完整DNA和消化DNA Southern杂交分析结果进一步表明，上述高拷贝数的载体以串联重复排列的方式整合于宿主基因组。