新鲜脱脂牛乳 1L , 20g / L 石蕊水溶液10ml（16g / L 溴jiafen紫乙醇溶液lml）( pH6.8 ）。
将新鲜牛乳隔水煮沸 30min ，冷却后置4 ℃ 冰箱内过夜。用吸管吸出下层乳汁，注入另一烧瓶内，弃去上层乳脂。加入石蕊溶液，分装试管，灭菌113 ℃ 15min （或间歇灭菌）。置35℃ 培养24-48h ，若无细菌生长，即可4 ℃ 冷藏备用
将被检菌接种于上述培养基中，若为芽胞梭菌，要在培养基内加入微量铁末，于 35℃ 培养8-24h 必要时可延长至14 天。
4、观察结果
产酸 因发酵乳糖而产酸，使指示剂变为粉红色
产气 发酵乳糖同时产气，可冲开上面的凡士林
凝固 因产酸太多而使牛乳中的酪蛋白凝固
胨化 将凝固的酪蛋白继续水解为胨，培养基上层液体变清，底部可留有未被完全胨化的酪蛋白
产碱 乳糖不发酵，因分解含氮物质，生成胺及氨，培养基变碱，指示剂变为蓝色
不变 乳糖不发酵，指示剂无变化，与未接种管相同
白色 石蕊被还原成白色
5、质量控制
粪产碱杆菌 ，碱性反应，培养基呈蓝色；变形杆菌，没有变化，培养基仍呈紫色；产气荚膜梭菌，急骤发酵，酸凝块被气体破坏。
注：培养基在灭菌前加入凡士林，可观察厌氧菌对牛乳中乳糖分解清况。若全脂牛奶需行脱脂处理，该培养基 pH6.8，呈紫色
二、疱肉培养基
主要用于梭菌属的培养
牛肉渣 0.5g，牛肉浸液7ml（pH 7.6 ）。
将干燥的肉渣 0.5g装入15mm×150mm试管内，再加入pH7.6牛肉浸液7ml，两者高度比例为1：2 。
在试管液面上加一层 3-4mm厚度的融化凡士林。用橡皮塞塞紧，经121 ℃ 灭菌15min 后，置4 ℃ 冰箱备。
将各种采集的标本，在 2h 内取0.5ml种入培养基底层，立即置35-37℃ 厌氧恒温箱内进行培养，2-7天观察结果。若发现培养基有混浊、沉淀、粘性菌膜生长现象，及培养物的臭味、肉渣的消化、变色、产气等清况，用以判断结果，并进行涂片染色镜检及分离培养。一般在培养48h 以后开始观察，直至3 周，无细菌生长，即可报告阴性
4、质量控制
破伤风杆菌 或坏死梭杆菌 48h 的培养物稀释1 000 倍，接种0.01 ml，生长良好
置 4 ℃ 冰箱内，数月有效
注：培养基的管口要密封，使用时将培养基置于水浴中煮沸 10min ，以除去管内残存的氧。为提高培养效果，在底层可放少许铁粉作为还原剂。
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